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細胞侵襲簡介
細胞侵襲實驗是一種體外實驗方法,通過構建人工基底膜,模擬體內細胞外基質的環(huán)境,觀察細胞在此環(huán)境中的侵襲能力。實驗通常使用細胞小室,上室接種腫瘤細胞,下室加入趨化因子或完全培養(yǎng)基,通過檢測細胞穿越基底膜進入下室的數(shù)量來反映細胞的侵襲能力。
實驗目的
通過細胞侵襲對比實驗,研究耐思基質膠和進口品牌基質膠在侵襲過程中侵襲能力的對比,以及耐思胎牛血清和進口胎牛血清在在該實驗過程中的效果差異,為腫瘤細胞的侵襲機制提供實驗對比依據(jù)。
實驗過程
鋪膠→接種→培養(yǎng)→染色→觀察
1. 按照說明書,用無血清培養(yǎng)基稀釋基質膠,加入耐思細胞小室上室,鋪滿底部進行孵育成膠。
2. 吸出上室中多余液體,使用無血清培養(yǎng)基接種細胞,下室加入完全培養(yǎng)基,放回小室時注意不要產生氣泡。
3. 將細胞小室板放回37℃、5% 二氧化碳培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。
4. 棄去上室和下室的培養(yǎng)基,使用PBS清洗上室和下室。用棉簽輕輕擦去上室中未侵襲的細胞,加入固定劑固定30分鐘。晾干小室,加入結晶紫溶液染色30分鐘。
5. 棄去結晶紫溶液,使用PBS清洗后晾干小室。
6. 顯微鏡觀察并拍照記錄實驗結果。
實驗結果
根據(jù)實驗染色結果可見:
1. 在侵襲實驗中,耐思基質膠與進口C品牌基質膠效果無明顯差異;
2. 在侵襲實驗中,胎牛血清作為影響因子,耐思南美胎牛血清效果雖略低于進口G品牌胎牛血清,但優(yōu)于某品牌進口血源的胎牛血清;
3. 綜合顯示,在細胞侵襲實驗中,耐思的細胞小室、耐思胎牛血清、耐思基質膠等耗材,可以支持完整的侵襲實驗流程,提供完善的耗材支持。
選購指南
一、細胞小室
二、胎牛血清
三、GelNest?基質膠